彼得·帕克（蜘蛛俠） 演員：托比·馬奎爾
一名大學(xué)生，同時(shí)也是蜘蛛俠。他用蜘蛛俠身份來制止犯罪這一行為花掉了他大量的時(shí)間和精力，導(dǎo)致他的學(xué)業(yè)和戀愛都非常不順利，這讓他感到動(dòng)搖，也漸漸失去了蜘蛛俠的超能力。但是章魚博士的出現(xiàn)，以及在瑪麗簡(jiǎn)的安危受到威脅時(shí)，他再次堅(jiān)定了信念，恢復(fù)了蜘蛛俠的超能力，并解除了紐約市的巨大危機(jī)。
瑪麗·簡(jiǎn)·沃森 演員：克爾斯滕·鄧斯特
歌劇表演者，非常有人氣，街頭巷尾都貼滿了她的海報(bào)。她喜歡彼得帕克，希望他能來看一次自己的演出，但彼得卻一次次讓她失望，導(dǎo)致她心灰意冷，決心嫁給其他人。但是她真心喜歡的人并不是她的未婚夫。在被章魚博士抓走后，她得知了蜘蛛俠的真實(shí)身份就是彼得，并重新回到了彼得的懷抱。
章魚博士 演員：阿爾弗雷德·莫里納
物理學(xué)博士。一心想研制出人造太陽從而獲得無限的能源。在一次實(shí)驗(yàn)失敗時(shí)，過剩的能量擊穿了他腦后的電子保護(hù)裝置，導(dǎo)致他被自己制作的巨大機(jī)械爪控制了心智，令他想要再次發(fā)起瘋狂的實(shí)驗(yàn)，這次實(shí)驗(yàn)致使紐約市危在旦夕，在與蜘蛛俠的最后較量中，他恢復(fù)了心智，并決心與他的人造太陽同歸于盡。
哈里·奧斯本 演員：詹姆斯·弗蘭科
彼得帕克最親密的朋友。他資助章魚博士研制人造太陽，但是實(shí)驗(yàn)失敗，他把這些責(zé)任都?xì)w結(jié)到蜘蛛俠的身上，同時(shí)蜘蛛俠也是他的殺父仇人，他一心想要替父報(bào)仇。但是在得知蜘蛛俠的真實(shí)身份就是彼得時(shí)，他卻不忍心下手。最后陰差陽錯(cuò)地發(fā)現(xiàn)了他父親的隱藏實(shí)驗(yàn)室，里面放著綠魔的面具和裝備。
